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Service de production et purification de protéine recombinante en cellules mammifères
Le service d’expression de protéine proposé par Proteogenix fonctionne par phases :
Phase 0 : Synthèse de gène et optimisation de codons
L’étape de synthèse de gène est très importante puisqu’elle nous permet d’optimiser les codons rares pour le système d’expression en cellules mammifères et donc d’augmenter dans certains cas les rendements de production de manière considérable.
Phase I : Clonage de l’ADNc en vecteur d’expression
Cette étape consiste à intégrer l’ADNc dans un ou plusieurs vecteurs d’expression en cellules mammifères contenant un tag qui permettra de purifier la protéine sur colonne.
Phase II : Evaluation de l’expression transitoire de la protéine recombinante et purification
- Evaluation de l’expression et optimization à partir de faibles volumes de culture
- Expression pilote suivi d’une étape de purification
Phase III : Scale-up de la production et purification de protéine
- Préparation des semences, run de production en bioréacteur, récolte et clarification
- Une étape de purification par chromatographie d’affinité
- Contrôle qualité par Gel SDS-PAGE et/ou Western blot