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Proteogenix – Production de protéine recombinante
Production de protéine post génomique
L’avènement de la génomique a bouleversé l’industrie de la production de protéine recombinante. La demande des secteurs du diagnostic, de la recherche, du médicament, vétérinaire, industriel est en pleine croissance. Les laboratoires d’expression de protéine recombinante doivent s’adapter pour trouver des techniques toujours plus innovantes afin de produire et de purifier les protéines de leurs clients le plus rapidement possible et avec des rendements les plus élevés possibles.
Proteogenix exploite toutes les techniques et astuces permettant d’améliorer les rendements, la pureté et le repliement que ce soit pour la production dans E.Coli (Escherichia Coli), l’expression dans la levure, l’expression en baculovirus / cellules d’insectes ou la production dans des cellules mammifères (CHO, HEK293) en système transitoire ou stable.
Conditions d’expression (tag, vecteur, souches bactériennes…)
Pour ce faire, Proteogenix a organisé ses laboratoires de manière à lui permettre de tester dans un laps de temps le plus court possible, un grand nombre de conditions de production et de purification de protéines recombinantes. Plus on dispose de solutions pour faire varier les paramètres, plus on optimise la production des protéines recombinantes dont les conditions optimales diffèrent grandement d’une protéine à l’autre.
Notre forte expérience dans la production de protéine recombinante nous permet de bénéficier d’un grand nombre d’avantages techniques offrant le maximum de chance de produire une protéine sous forme native, avec un bon rendement, une bonne pureté et un bon repliement. Nous intervenons à toutes les étapes : optimisation des codons, choix du vecteur, du tag, du milieu de culture, des additifs, des souches bactériennes, des températures d’induction, des concentrations en IPTG, du type de purification, de la technique de refolding (dialyse, changement de tampon, dilution rapide, refolding sur colonne…) Forte d’une expérience de plus de 15 ans dans la production de protéine recombinante, notre équipe conseille et apporte des éclairages et des orientations stratégiques sur les mesures techniques à prendre en fonction des protéines et des applications pour le client.
Cette flexibilité et cette expérience détenue par Proteogenix dans l’expression et la purification de protéines recombinantes est d’autant plus importante que les demandes concernent souvent des protéines très peu caractérisées. Il est donc souvent impossible de s’appuyer sur des essais de production déjà réalisés. Le maître mot reste la flexibilité qui découle aussi d’équipements particuliers et très spécifiques, permettant de faire varier de nombreux paramètres et de traiter différents échantillons simultanément. Les conditions d’expression sont très différentes d’une protéine à l’autre et la maitrise des différents systèmes d’expression représente un atout majeur pour réussir dans le domaine de la production de protéine recombinante.
Tags : poly-Histidine, GST, MBP
L’utilisation de différents vecteurs d’expression comportant différents tags : poly-Histidine, GST, MBP ou pas de tag, fait partie des nombreuses possibilités offertes par Proteogenix. Les protéines peuvent être produites dans la fraction soluble ou dans les culots / corps d’inclusion. L’objectif est, dans la grande majorité des cas, de produire en condition native mais dans le cas où la protéine est produite en culots / corps d’inclusion, la protéine peut être extraite et purifiée en condition dénaturante. Il est ensuite possible de refolder / renaturer la protéine recombinante soit par dialyse, soit par dilution rapide (goutte à goutte), ou encore en effectuant une renaturation sur colonne.
Expression de protéine recombinante et littérature :
Lorsque des données relatives à des essais préalables d’expression / purification d’une protéine sont disponibles, soit par le biais des expérimentations du client soit par le biais de la littérature, ceci peut s’avérer dans certains cas une excellente source d’aide à la décision stratégique pour la production d’une protéine recombinante.