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Expression et purification de protéine dans la levure
PROTEOGENIX et la production de protéine dans la levure
La plateforme de production de protéine dans la levure représente une solution intéressante pour l’expression de protéine en cellule eucaryote. En effet, la levure permet de produire des quantités importantes de protéine recombinante à un coût raisonnable par rapport au système Baculovirus (cellules d’insectes) ou cellules mammifères (HEK293, CHO).
Les levures Pichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae, K. lactis et Pichia methanolica.
Une levure est un organisme unicellulaire (champignon) capable de provoquer la fermentation des matières organiques animales ou végétales. Saccharomyces cerevisiae dite la levure du boulanger puisqu’elle est utilisée pour faire le pain, est une levure très utilisée pour produire des protéines recombinantes à façon.
Avantages et inconvénients des systèmes d’expression dans la levure :
Contrairement à E. Coli, la levure permet de produire des protéines recombinantes avec des modifications post-traductionnelles (glycosylations simples, carboxylations, acylations…) mêmes si ces modifications ne sont pas aussi bien reproduites qu’avec des systèmes eucaryotes supérieurs (Baculovirus, cellules mammifères). Les rendements obtenus avec ce système sont élevés ce qui en fait un système intéressant.
L’inconvénient est que les protéines sont souvent produites dans le cytoplasme et il est donc nécessaire de casser les cellules pour y récupérer les protéines recombinantes exprimées.
D’autre part, la levure ne réalise les N- glycolsylations que partiellement dans le sens où elle produit des formes peu matures contenant beaucoup de mannose qui ne correspondent pas à celles qu’on retrouve sur les protéines de mammifères.
De nouveaux systèmes, récemment développés permettent de reproduire les modifications post traductionnelles comme les cellules mammifères. L’intérêt pour ce système est donc relancé pour la production de protéine à but thérapeutique puisqu’il permet un meilleur rendement que les systèmes d’expression en cellules mammifères et surtout dans un délai plus court.
Plus d’informations sur le protocole de production de protéine dans la levure ici.