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PURIFICATION D’ANTICORPS

Plusieurs méthodes de purification sont disponibles pour la purification de vos anticorps monoclonaux ou polyclonaux sur nos équipements HPLC/FPLC.

  • Purification sur colonne d’affinité couplée à l’antigène

C’est la méthode la plus efficace pour purifier les anticorps polyclonaux anti-peptide. Elle permet de les purifier grâce à une colonne sur laquelle est immobilisé un peptide et d’obtenir de l’anticorps très spécifique permettant ainsi de diminuer le bruit de fond. Il est également possible de fixer une protéine ou un mélange de protéines sur colonne pour réaliser le même type de purification mais les rendements sont plus variables et dépendent de la protéine.

  • Purification sur Protéine G

C’est une méthode fiable et répandue pour purifier les anticorps monoclonaux de toute sorte. Elle est également utilisée pour la purification d’anticorps polyclonaux. Elle permet de recouvrir plus de 90% de la fraction d’IgG d’un sérum, surnageant de culture ou liquide d’ascites

  • Purification sur Protéine A

Cette méthode peut être considérée comme équivalente aux colonnes de protéine G, permettant de recouvrir environ 90% de fraction d’IgG. Le choix entre une purification sur Protéine A ou G dépend grandement de l’isotype de l’anticorps et/ou de l’animal hôte.

  • Purifications spécifiques pour IgY

Ø Purification Niveau 1 : Précipitation au sulfate d’amoniumPureté> 96% IgY parmi l’ensemble des protéines mais quelques substances non protéiques subsistentLe rendement est de 400-1100 mg d’IgY à partir de 10 œufs immuns selon la quantité de jaune d’œuf. C’est une très bonne solution comparable au sérum brut chez le lapin.Ø Purification Niveau 2 : ChromatographiePureté>97% IgY parmi l’ensemble protéines.Pour plus de pureté «équivalent à une purification protein A. Les lipides sont éliminés ainsi que la majorité des endotoxines, de l’ADN et des autres substances.Rendement 350 à 900mg d’IgY.

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